产品货号:
SY0860
中文名称:
TaqMan qPCR MasterMix(多重探针)
英文名称:
2×Hiper Unicon TaqMan multiplex qPCR master mix
产品规格:
1mL|5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是2×探针法预混合qPCR试剂,能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本制品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶,极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时,本制品对多重反应缓冲体系进行了深度优化,能够提高反应的扩增效率,促进低浓度模板的有效扩增。本制品可用于基因分型和基因多重定量分析。
组分 | 1mL | 5mL |
2×TaqMan qPCR MasterMix(多重探针) | 1mL | 5mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,有效期2年。
- Applied Biosystems:5700,7000,7300,7700,7900HT Fast,StepOne,StepOne Plus,7500,7500 Fast,ViiA7,QuantStudio 3 and 5,QuantStudio 6,7,12k Flex;
- Bio-Rad:CFX96,CFX384,iCycler iQ,iQ5,MyiQ,MiniOpticon,Opticon,Opticon 2,Chromo4;
- Eppendorf:Mastercycler ep realplex,realplex 2 s;
- Qiagen:Corbett Rotor-Gene Q,Rotor-Gene 3000,Rotor-Gene 6000;
- Roche Applied Science:LightCycler 480,LightCycler 2.0;Lightcycler 96;
- Stratagene:MX3000P,MX3005P,MX4000P;
- Thermo Scientific:PikoReal Cycler;Cepheid:SmartCycler;Illumina:Eco qPCR。
1.按下表加入各成分,配制反应体系:
成分 | 用量 | 终浓度 |
2×TaqMan qPCR Mix | 12.5μL | 1× |
Primer mix (10μM) | X | 0.1μM~0.5μM |
Probe mix (10μM) | Y | 50 nM~250 nM |
Rox reference dye | 0.5μL | 1× |
模板DNA或cDNA | 1~10μL | - |
ddH2O | 至25μL | - |
- 使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
- 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.2μM,也可以根据情况在0.1~0.5μM间进行调整;
- 探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50~250 nM间调整;
- Rox reference dye:本制品不含Rox reference dye。如需,可选购ROX参考染料(货号:SY0868);
- 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液,则模板体积不超过总体积的1/10;
- 反应体系:推荐使用25μL、30μL或50μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性;
- 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头,避免交叉污染和气溶胶污染。
2.参考扩增程序
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 5min | 1 |
变性 | 95℃ | 15sec | 45 |
退火/延伸 | 60℃ | 30sec |
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